Sigma：膠原酶，C1639-50MG

屬性：

質(zhì)量水平：200

無(wú)菌性：0.2 μm filtered

形式：lyophilized powder

specific activity：≥125 CDU/mg solid
0.2-1.0 FALGPA units/mg solid

分子量：68-130 kDa

儲存溫度：?20°C

應用：

該產(chǎn)品適用于人類(lèi)腫瘤，小鼠腎臟，人類(lèi)成人和胎兒的腦、肺和許多其他上皮組織的解聚。 它還被證明適用于肝臟和腎臟灌注研究、胰腺消化、非實(shí)質(zhì)性大鼠肝細胞的分離、以及肝細胞制備。 膠原酶也已用于制備動(dòng)脈組織，以對晚期糖基化終產(chǎn)物進(jìn)行研究。 該酶用于（濃度約為1mg/ml）對肝細胞的釋放進(jìn)行檢測。 消化濃度范圍為0.1至5mg/mL。

生化/生理作用：

膠原酶產(chǎn)物是 C. histolyticum分泌的酶混合物，可通過(guò)分泌酶中10-18個(gè)組分的相對比率來(lái)區分不同的產(chǎn)物。 其主要成分是兩種膠原酶、梭菌蛋白酶、和一種中性dan白酶。 這些酶的協(xié)同作用可降解膠原蛋白和其他細胞內物質(zhì)。膠原酶和中性dan白酶的作用對于從組織中有效釋放細胞是必需的。 各種類(lèi)型的膠原蛋白都是膠原酶的天然底物。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱gan肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

注意：

以原包裝形式，該產(chǎn)品在-20°C下可穩定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下30天內，FALGPA或蛋白酶活性沒(méi)有損失。如果分液（10mg/mL）形式快速冷凍并且在-20℃下冷凍保存，粗膠原酶的溶液可保持穩定。進(jìn)一步的凍融步驟會(huì )破壞溶液穩定性。 當在冰上保持時(shí)，該產(chǎn)品可在7小時(shí)內保持100％活性。

單位定義：

一個(gè)膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮an酸，5小時(shí)，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個(gè) FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個(gè)中性dan白酶單元水解酪蛋白，產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪an酸每5小時(shí)，pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個(gè)梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

制備說(shuō)明：

從I型（C0130）制備得到?？梢酝ㄟ^(guò)在37℃下將0.05-0.1mg/mL膠原酶溶解在含有0.36mM氯化鈣（TESCA，pH7.4）的50mM TES緩沖液中，以制備儲備溶液。

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