Sigma試劑:藥典重組胰蛋白酶，T3924-100ML

屬性：

生物來(lái)源：Porcine

質(zhì)量水平：400

無(wú)菌性：sterile; sterile-filtered

產(chǎn)品線(xiàn)：BioReagent

形式：solution

分子量：23.4 kDa

濃度：1 ×

應用：cell culture | mammalian: suitable

雜質(zhì)：Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH值（酸堿度）：7.0-9.0

運輸：dry ice

儲存溫度：?20°C

應用：

本品的典型用途是使貼壁細胞從培養表面脫落。 使細胞解離所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類(lèi)型和培養物代數。

生化/生理作用：

胰蛋白酶可切割賴(lài)氨酸和精氨酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的任意一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側，則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑，用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除這些離子會(huì )增加酶活性。

絲氨酸蛋白酶抑制劑（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）會(huì )抑制胰蛋白酶。

組分：

胰蛋白酶是由含223個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽組成的，它通過(guò)切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽鍵以去除N-末端六肽而獲得。 氨基酸序列通過(guò)6個(gè)二硫鍵交聯(lián)。 這是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser殘基處斷裂，產(chǎn)生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。

注意：

本品應置于-10至-40°C環(huán)境冷凍儲存。避免反復凍融。

制備說(shuō)明：

本產(chǎn)品含有酚紅。 由于在干冰上運輸，包裝中可能累積大量二氧化碳。 這些CO2可能會(huì )進(jìn)入溶液并略微降低pH值，使溶液呈橙色而不是粉紅色。 橙色溶液仍然可以使用，或者可以用氫氧化鈉調節pH。 使用高濃度胰蛋白酶長(cháng)時(shí)間孵育細胞，會(huì )破壞細胞膜并殺死細胞。 溶解胰蛋白酶或稀釋濃縮胰蛋白酶溶液時(shí)，應使用不含Ca2+ 或Mg2+的緩沖鹽溶液。

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