Sigma試劑:藥典重組胰蛋白酶,T8003-100MG,CAS: 9002-07-7

屬性：

質(zhì)量水平：200

類(lèi)型：Type I

形式：solid

specific activity：~10,000 BAEE units/mg protein

分子量：23.8 kDa

組成:protein, 90-100%

溶解性：hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear

異質(zhì)活性：Chymotrypsin ≤4 BTEE units/mg protein

運輸：wet ice

儲存溫度：?20°C

應用：對于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用約為 1：100 至 1:20 的比例。從培養表面除去粘附細胞是本產(chǎn)品的一個(gè)典型應用。 從其底物中去除細胞所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類(lèi)型和培養物的年齡。 胰蛋白酶也被用于細胞培養期間細胞的再懸浮、蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的蛋白質(zhì)消化和各種凝膠內消化。 其他應用包括：通過(guò)基于膜的技術(shù)評估結晶，用在確定動(dòng)力學(xué)陷阱的存在會(huì )限制蛋白質(zhì)的折疊速率和產(chǎn)量的一項研究中。

包裝：1, 10 g in glass bottle、100, 500 mg in glass bottle

生化/生理作用：胰蛋白酶切割賴(lài)氨酸和精氨酸殘基的 C 端肽。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的任一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側，則停止水解。 胰蛋白酶活性的最適 pH 為 7-9。 胰蛋白酶還可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵的作用。 將 EDTA 作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和鈣離子和鎂離子，這些離子遮蔽胰蛋白酶作用的肽鍵。 去除這些離子會(huì )增加酶活性。

絲氨酸蛋白酶抑制劑，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，將抑制胰蛋白酶。

組分：胰蛋白酶由 223 個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽組成，通過(guò)從胰蛋白酶原去除 N-末端六肽而產(chǎn)生，胰蛋白酶原在 Lys-1le 肽鍵處被切割。 氨基酸序列通過(guò) 6 個(gè)二硫鍵交聯(lián)。 這是胰蛋白酶，beta-胰蛋白酶的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可以自溶，在 Lys-Ser 殘基位點(diǎn)切割，產(chǎn)生 α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。

注意：1mM HCl 溶液以等分試樣可穩定保存 1 年，儲存于 -20℃。Ca2+ 的存在也會(huì )減少胰蛋白酶的自溶，并維持其在溶液中的穩定性。 在 2.0M 尿素，2.0M 鹽酸胍或 0.1％（w/v）SDS 溶液中，胰蛋白酶也將保留其大部分活性。

單位定義：使用 BAEE 作為底物，一個(gè) BAEE 單元，將在 pH 7.6，25℃ 下，每分鐘產(chǎn)生 0.001 的 A253。

制備說(shuō)明：溶于 1 mM HCl，濃度為 1 mg/mL。

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