Sigma試劑:胰蛋白酶-EDTA 溶液，T4174-20ML

屬性：

生物來(lái)源：Porcine

質(zhì)量水平：400

無(wú)菌性：sterile-filtered

產(chǎn)品線(xiàn)：BioReagent

形式：solution

分子量：23.4 kDa

濃度：10 ×

應用：cell culture | mammalian: suitable

雜質(zhì)：Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH值（酸堿度）：7.0-7.6

運輸：dry ice

儲存溫度：?20°C

應用：

該產(chǎn)品的典型用途是使貼壁細胞從培養表面脫落。使細胞從附著(zhù)面脫落所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類(lèi)型和培養階段。
胰蛋白酶-EDTA溶液可用于以下應用：

用作細胞培養物中的補充劑，以維持細胞生長(cháng)

在收獲生長(cháng)至融合狀態(tài)的細胞

時(shí)，用以使慢病毒轉導的巨噬細胞脫落

生化/生理作用：

胰蛋白酶可切割賴(lài)氨酸和精氨酸殘基的C端肽。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的兩側，則該反應的水解速度減慢，而如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側，則不水解。 胰蛋白酶活性的最佳pH為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯鍵和酰胺鍵。 將EDTA作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中，可中和掩蓋胰蛋白酶作用肽鍵的鈣鎂離子。 去除這些離子可增加酶活性。

DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等絲氨酸蛋白酶抑制劑可抑制胰蛋白酶。

組分

胰蛋白酶由含有223個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽組成，由胰蛋白酶原在Lys - lle肽鍵處切去N-端六肽而得。 這些氨基酸序列通過(guò)6個(gè)二硫鍵交聯(lián)。 這就是胰蛋白酶（即β-胰蛋白酶）的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可自溶，在Lys-Ser殘基裂解，產(chǎn)生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。

注意

本品應置于-10至-40°C環(huán)境冷凍儲存。避免反復凍融。

制備說(shuō)明

用濃度過(guò)高的胰蛋白酶長(cháng)時(shí)間孵育細胞會(huì )破壞細胞膜并殺死細胞。 溶解胰蛋白酶或由濃溶液稀釋?xiě)褂貌缓?/span>Ca2+ 或Mg2+的緩沖鹽溶液。

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