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Sigma:間質(zhì)膠原酶IV,C1889-50MG
更新時(shí)間:2023-05-17
訪(fǎng)問(wèn)量:851
廠(chǎng)商性質(zhì):代理商
產(chǎn)品品牌:Sigma-Aldrich
Sigma:間質(zhì)膠原酶IV,C1889-50MG,CAS: 9001-12-1
屬性:
質(zhì)量水平:200
無(wú)菌性:sterile-filtered
形式:powder
specific activity:≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量:68-130 kDa
適用性:release of physiologically active rat hepatocytes tested
特色行業(yè):Diagnostic Assay Manufacturing
儲存溫度:?20°C
一般描述:
溶組織梭菌含有兩種膠原酶,可剪切膠原酶三螺旋不同的切割位點(diǎn)。切割效率比哺乳動(dòng)物膠原酶更高。梭菌膠原酶與氣性壞疽的細菌侵襲有關(guān)。
應用:
膠原酶已被用于制備動(dòng)脈組織,用于研究晚期糖基化終產(chǎn)物(AGE)。該酶還與其他蛋白酶一起用于人腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮和許多其他組織的解聚。它在肝臟和腎臟灌注研究,胰腺消化和非實(shí)質(zhì)肝細胞的分離中也是有效的。當測試該酶是否適合釋放肝細胞時(shí)。對于每只大鼠肝臟,膠原酶以約 1mg/mL 使用,總體積為 100mL。
膠原酶(源于溶組織梭菌)用于解離組織樣本,如脾臟和睪丸組織。
生化/生理作用:
從組織中有效釋放細胞需要膠原酶和中性蛋白酶的作用。膠原酶被每克摩爾酶 4 克原子鈣(Ca2+)活化。培養濾液被認為含有至少 7 種不同的蛋白酶,分子量范圍為 68-130 kDa(最適 pH 值:6.3-8.8)。該酶通常用于消化組織樣品中的結締組分以釋放單個(gè)細胞。膠原酶治療可導致一些細胞死亡。通常,用于消化的濃度為 0.1 至 5mg/mL。反應持續時(shí)間從 15 分鐘到幾小時(shí)不等,這使得能夠有效地解離細胞而不會(huì )導致過(guò)多的細胞死亡。具有鈣和 BSA 的 Krebs Ringer 緩沖液是優(yōu)選的,并且 Zn2+ 是其活性所必需的。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
注意:
根據提供,該產(chǎn)品在 -20°C 下,可穩定保存一年。在 37℃、50℃ 和 -20℃ 下,30 天內 FALGPA 或蛋白酶活性沒(méi)有損失。如果以等分試樣(10mg/mL)快速冷凍,并且在 -20℃ 下冷凍,則粗膠原酶的溶液是穩定的。進(jìn)一步的凍融循環(huán)會(huì )損壞溶液。 當在冰上保持時(shí),該產(chǎn)品在 7 小時(shí)內保持 100% 活性。
單位定義:
一個(gè)膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,5小時(shí),pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個(gè) FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個(gè)中性蛋白酶單元水解酪蛋白,產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時(shí),pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個(gè)梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說(shuō)明:
從 IV 型(C5138)制備??梢酝ㄟ^(guò)在 37℃ 下,將 0.05-0.1mg/mL 膠原酶溶解在含有 0.36mM 氯化鈣(TESCA)(pH 7.4)的 50mM TES 緩沖液中來(lái)制備儲備溶液。該產(chǎn)品還含有梭菌蛋白酶,非特異性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
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主營(yíng)產(chǎn)品:
試劑盒:ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細胞凋亡試劑盒
細胞培養:血清,培養基、胰酶、雙抗等
耗材:進(jìn)口、國產(chǎn)細胞培養耗材、普通實(shí)驗儀器及耗材
生化試劑:進(jìn)口原裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑
抗體:進(jìn)口、國產(chǎn)原裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等
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