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    血清使用過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題

    發(fā)布時(shí)間: 2022-04-20  點(diǎn)擊次數: 1148次

    清使用過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題

    ① 保存血清最好方法是什么?

    我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。但是若存放于4℃時(shí),請勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當的無(wú)菌容器內,再放回冷凍。反復凍融會(huì )對血清的品質(zhì)造成不良影響。

    ② 如何解凍血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

    我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。

    ③ 血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?

    血清在解凍過(guò)程(包括沒(méi)有*解凍)或儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等)可能會(huì )聚集成團,形成絮狀沉淀或外觀(guān)混濁;在運輸過(guò)程中,由于時(shí)間較長(cháng),所以往往有少許解凍,因此也可能稍有沉淀,但這些都不影響血清性能。

    若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會(huì )阻塞過(guò)濾膜。

    ④ 何謂熱滅活?

    一般是以56℃,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。

    ⑤ 有必要作熱滅活嗎?

    實(shí)驗顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對細胞的生長(cháng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清質(zhì)量,而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱滅活的血清,沉淀物的形成,會(huì )顯著(zhù)增多,這些沉淀物在導致顯微鏡下觀(guān)察,像是“小黑點(diǎn)",常常會(huì )讓研究者認為血清遭受污染,而把血清放進(jìn)37℃環(huán)境中,又會(huì )使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

    因此我們建議您,若非必須,您可以不做熱滅活處理血清。這樣,不僅節省您寶貴時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。只在做免疫學(xué)研究或培養干細胞,昆蟲(chóng)細胞和平滑肌細胞時(shí)才推薦做熱滅活。我公司也有已經(jīng)熱滅活的血清可供選擇。

    ⑥ 如何減少沉淀物的產(chǎn)生?

    我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:

    ● 解凍血清時(shí),請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí),改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

    ● 解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。

    ● 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì )變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩定的成分也會(huì )因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。

    ● 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則毋須做此步驟。

    若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì )造成沉淀物的增多。

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