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    小鼠elisa kit的處理方法以及注意事項說(shuō)明

    發(fā)布時(shí)間： 2021-10-26　　點(diǎn)擊次數： 798次
     　　小鼠elisa kit的處理方法有哪些呢？今天我們來(lái)詳細講解一下！
    　　純化的小鼠C-反應蛋白(CRP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入C-反應蛋白(CRP)，再與HRP標記的C-反應蛋白(CRP)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C-反應蛋白(CRP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值)，通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中小鼠C-反應蛋白(CRP)的含量。
    　　elisa屬于固相免疫分析，抗原和抗體的結合只發(fā)生在固相表面。以抗體包被的三明治法為例，添加到板孔中的抗原不具有固相抗結合的平等機會(huì )。只有靠近孔壁的一層溶液中的抗原與抗體直接接觸。這是一個(gè)逐漸平衡的過(guò)程，因此需要擴散才能達到反應的終點(diǎn)。隨后添加到固相抗原的酶標記抗體的結合也是如此。
    　　不管你對實(shí)驗在懂，了解相關(guān)注意事項那是很有必要的，這不僅可以培養我們養成好的實(shí)驗習慣，還可以減少問(wèn)題的。下面給大家講述一下小鼠elisa kit使用注意事項。
    　　1、嚴格按照規定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育。所有試劑都須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
    　　2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前盡量吸干孔內液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
    　　3、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
    　　4、底物顯色液應呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
    　　5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
    　　6、在儲存和溫育時(shí)避免強光直接照射。
    　　7、平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
    　　8、包括小鼠elisa kit在內的任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的氣體。任何漂白成分都會(huì )破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
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