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藥典重組胰蛋白酶|生物百科
發(fā)布時(shí)間： 2023-05-19 點(diǎn)擊次數： 867次藥典重組胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，能特異性地切割賴(lài)氨酸和精氨酸的C端肽鍵。胰蛋白酶可廣泛應用于各種生物技術(shù)過(guò)程中。例如：蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)生肽；各種組織的細胞分離；蛋白質(zhì)的酶解和測序；重組胰島素生產(chǎn)等。
胰蛋白酶可以特異性地切割賴(lài)氨酸和精氨酸C端肽鍵，降解細胞間結合蛋白。所制備的重組豬胰蛋白酶的氨基酸序列與重組大腸桿菌表達和生產(chǎn)的豬胰蛋白酶的氨基酸序列一致。在疫苗、干細胞、免疫細胞治療、藥物篩選、抗體等領(lǐng)域可替代傳統提取的胰蛋白酶用于細胞消化。抑肽酶和大豆胰蛋白酶以制劑可以以制酶的活性。
胰蛋白酶是從牛、豬和羊的胰腺中提取的冷凍干燥制劑，經(jīng)過(guò)純化和結晶。溶于水，不溶于氯仿、乙醇、乙迷等有機溶劑。在ph1.8時(shí)，短時(shí)間煮沸幾乎不失活；當在堿性溶液中加熱時(shí)，它變性和沉淀，Ca2+具有保護和激活作用，胰蛋白酶的等電點(diǎn)為ph10.1。
藥典重組胰蛋白酶的使用方法是推薦使用1mM HCl溶液溶解，胰蛋白酶：目標蛋白=1:50-1:1000，pH值7.0-9.0，溫度25-35℃。注意，活性受絲氨酸蛋白酶以制劑(如PMSF)的影響，金屬離子螯合劑(如EDTA)將以制酶活性；高濃度的無(wú)機鹽會(huì )對酶的活性產(chǎn)生一定的影響。
本產(chǎn)品為重組產(chǎn)物，不含雜酶，宿主蛋白和DNA殘留符合藥典標準。重組生產(chǎn)，生產(chǎn)過(guò)程中不使用任何動(dòng)物原料。無(wú)外源性病毒污染，使用按全。純度高，避免雜質(zhì)對細胞生長(cháng)的影響。高比活性和低胰蛋白酶添加量可達到所需的消化效果。
藥典重組胰蛋白酶能切斷多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸殘基的羧基側。它不僅作為一種消化酶，而且還限制其他酶如糜蛋白酶原、羧肽酶和磷脂酰蛋白原前體的分解。它是特異的蛋白酶。它已成為測定蛋白質(zhì)氨基酸排列的*的工具。
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